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内切β1,4葡聚糖酶(Cx)测试盒微量法

简要描述:内切β1,4葡聚糖酶(Cx)测试盒微量法公司正在出售的产品:新生A进口、国产Novobiocin添加于100ml mEC肉汤和mTSB肉汤中用于0157选择性增菌2mg/支*5SD-39琼脂进口、国产SD-39 Agar用于滤膜法大肠杆菌0157的分离培养(NEOGEN方法)250平板计数琼脂(PCA)进口、国产Plate Count Agar国际标准平板计数琼脂,含糖,用于细菌总数的测定(SN标

  • 产品型号:
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-12-25
  • 访  问  量:317

详细介绍

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

内切β1,4葡聚糖酶(Cx)测试盒微量法

100管/48样

微量法

BK-01S6779

商品介绍:

测定意义:

Cx存在于细菌、真菌和动物体内,是纤维素酶系的组份之一,Cx主要作用于非晶态纤维素和水溶性纤维素衍生物,随机水解糖苷键,将其分解成葡萄糖、纤维二糖、纤维三糖和其他寡聚体。

测定原理:

采用3,5-二硝基水杨酸法测定Cx催化羧甲基纤维素钠降解产生的还原糖的含量。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

 

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

25g 叠氮钠 Sodium Azide 常温保存

50T 鸭瘟病毒PCR检测试剂盒   低温运输,-20℃保存

200 mL 分离液1.077 Cell Separation Solution -20℃保存

100mL HEPES Buffer,0.5M,pH8.5   HEPES Buffer,0.5M,pH8.5   常温保存

100次 免DNA提取PCR试剂盒 Cell Lysate PCR Mix -20℃保存

50T 卡氏肺胞子虫PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

绿脓菌素测定用假单胞菌琼脂(PAP)  250g

1瓶 MLTC-1细胞株 MLTC-1 低温运输和保存

乳糖莫能葡萄糖醛酸琼脂 LMG Agar 250g

5g 牛血清白蛋白 Albumin From Bovine Serum 4℃保存

250mL Tissue Embedding Reagent  Tissue Embedding Reagent  常温保存

内切β1,4葡聚糖酶(Cx)测试盒微量法Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Cy3  Cy3标记的兔抗豚鼠IgM 规格: 0.1mlSNTG2/Syntrophin 5  肌蛋白结合蛋白γ2抗体 规格: 0.2ml

LRRC4B/NGL3  神经突触蛋白NGL3抗体 规格: 0.2mlphospho-STAT5a(Tyr694)  磷酸化信号转导和转录激活因子5a抗体 规格: 0.1ml

IGF1R/CD221  胰岛素样生因子1受体抗体 规格: 0.1mlNectin 2/CD112  细胞粘附分子CD112抗体 规格: 0.1ml

ANGPTL5  管生成素相关蛋白5 规格: 0.2mlEgr1  早期生应答蛋白1抗体 规格: 0.1ml

BGP/Osteocalcin  骨保护蛋白/骨钙素抗体 规格: 0.1mlDonkey Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的驴抗兔IgG 规格: 0.1ml

TAG1/CNTN2  瞬时表达轴索糖蛋白1抗体 规格: 0.1mlCXCR5/CD185  细胞表面趋化因子受体5抗体 规格: 0.1ml

Ninein/GSK3B interacting protein  GSK3B相互作用蛋白抗体 规格: 0.2mlAxin 2  轴抑制蛋白2抗体 规格: 0.2ml

phospho-HSF1(Ser303)  磷酸化热休克因子1抗体 规格: 0.2mlPAR-1/Thrombin receptor  蛋白激活受体-1抗体 规格: 0.1ml

MCT1  单羧酸转运蛋白-1抗体 规格: 0.2mlPhospho-Histone H3 (Ser10)  磷酸化组蛋白H3抗体 规格: 0.1ml

SUGT1  SUGT1蛋白抗体 规格: 0.2mlTBX3  转录因子Tbx3抗体 规格: 0.2ml

EGR3  早期生反应蛋白3抗体 规格: 0.1mlDVL2  蓬乱蛋白2抗体 规格: 0.2ml

G protein beta 3/GNB3  G蛋白β3抗体/核苷酸结合蛋白β亚基3 规格: 0.2mlLOXL4  赖氨酰氧化样蛋白4抗体 规格: 0.2ml

 


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