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土壤几丁质酶测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 208
更新时间: 2022-05-30
描述:土壤几丁质酶测试盒微量法公司正在出售的产品:明胶基础 进口、国产Gelatin Medium Base生化试验,用于细菌明胶液化试验(GB标准)250绿脓菌素测定(PDP) 进口、国产King Medium A 用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验(GB标准)250乳糖胆盐 进口、国产Lactose Bile Medium用于化妆品中粪大肠菌群的测定(GB标准)250TTC-吐温80-营养琼脂

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6868

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:土壤几丁质酶测试盒微量法

产品规格:100管/48样

检测方法:微量法

产品货号:BK-01S6868

产品分类:土壤系列
商品介绍:

测定意义:

几丁质主要存在于虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳与软体动物的器官(例如乌贼的软骨),以及真菌类的细胞壁中,而几丁质酶(EC 3.2.1.14)可催化几丁质水解,具有抵御真菌侵染的作用,成为抗真菌病害的研究热点。

测定原理

几丁质酶水解几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖,进一步与对二甲氨基产生红色化合物,在585nm处有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了几丁质酶的活性。

自备实验用品及仪器

天平、水浴锅、离心机、震荡仪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板,甲苯、蒸馏水。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

MRS MRS Medium 250g

100m 抑制剂 Trypsin Inhibitor -20℃保存

50T 猪内源性逆转录病毒PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

100次 GSH和GSSG试剂盒 Oxidative Stress Detection Kit 常温保存

菌种芽孢 Bacillus Bacteria Medium 250g

300次 即用型荧光定量RT-PCR试剂盒 Instant Realtime RT-PCR Kit -20℃保存

2 ug pLVX-IRES-Puro pLVX-IRES-Puro 低温运输,-20℃保存

ATCC:2693改良Dixon(mDixon)  250g

1瓶 OCM-1A细胞株 OCM-1A 低温运输和保存

胰蛋白胨胆盐琼脂(TBA)(ISO9038-1-2000)  250g

100mg 5-溴-4-氯-3--β-D-半乳糖苷 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-Beta-D-Galactopyranoside -20℃保存

土壤几丁质酶测试盒微量法Donkey Anti-Goat IgG/RBITC  罗丹明标记的驴抗羊IgG 规格: 0.1ml

phospho-c-Jun(Ser63)  磷酸化原基因c-Jun抗体 规格: 0.1ml

Gigaxonin  巨轴索神经蛋白GAN抗体 规格: 0.2ml

TSHR (CT)  促甲状素受体抗体(C端) 规格: 0.1ml

RbAp48  视网膜母细胞瘤结合蛋白P48抗体 规格: 0.2ml

ADAM28  去整合素样金属蛋白28抗体 规格: 0.2ml

ADNP/NAP  活性依赖的神经保护肽抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-Bov IgG/Cy3  Cy3标记的兔抗牛IgG  规格: 0.1ml

BNP  脑钠素抗体 规格: 0.1ml

ABC2/C17orf71  增强蛋白2抗体 规格: 0.2ml

phospho-E2F1 (Ser337)  磷酸化转录因子E2F-1抗体 规格: 0.1ml

GIG8/ID2  DNA结合抑制因子2抗体 规格: 0.1ml 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

 


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