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产品名称:

漆酶测试盒微量法

产品厂地: 上海市
访问次数: 103
更新时间: 2022-05-30
描述:漆酶测试盒微量法公司正在出售的产品:血琼脂基础进口、国产Blood Agar Base250克供分离营养要求较高的致病菌用改良罗氏基础进口、国产L-G Medium Base,Modified250克结核杆菌的培养,计数保存,照光试验,药物敏感性测定及菌型鉴定MiddleBrook 7H10琼脂进口、国产MiddleBrook 7H10 Agar250克分枝杆菌的分离培养MiddleBrook 7

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6937

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

漆酶测试盒微量法

100管/48样

微量法

BK-01S6937

商品介绍:

测定意义:

漆酶(Laccase)是一种含铜的多酚氧化酶,属于铜蓝氧化酶家族,广泛分布于真菌和高等植物中,具有较强的氧化还原能力,在纸浆生物漂白,环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。

测定原理

漆酶分解底物ABTS产生ABTS自由基,在420nm处的吸光系数远大于底物ABTS,测定ABTS自由基的增加速率,可计算得漆酶活性。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

100mL β- 巯基乙醇 β-Mercaptoethanol 室温避光保存

50T 脑膜炎细菌多重PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

1 g 5-FITC Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

100mL Bis-Tris Propane,0.2M,pH7.4   Bis-Tris Propane,0.2M,pH7.4   常温保存

50次 脉冲电泳Marker(酵母染色体PFG)  

50T 埃博拉病毒PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

酪蛋白胨大豆吐温20 Casein DigestSoy LecithinPolysorbate 20 Medium 250g

1瓶 HaCaT细胞株 HaCaT 低温运输和保存

250mlPreston肉汤均质袋(双料)  250ml/袋*10

1000 U 限制性内切SalI Restriction Endonuclease -20℃保存

125mL RIPA Buffer with Glycerol,2X  RIPA Buffer with Glycerol,2X  常温保存

漆酶测试盒微量法FBRSL1  毒X蛋白反转录蛋白9抗体 规格: 0.2ml

IL-6 (NT)  白介素6抗体(N端) 规格: 0.1ml

gamma tubulin(Centrosome Marker )  微管蛋白-γ抗体 规格: 0.1ml

RPS6KB1  核糖体S6蛋白激抗体 规格: 0.1ml

Nucleophosmin  核仁磷酸蛋白抗体 0.2ml

Mouse Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的小鼠抗兔IgG 规格: 0.1ml

CDK4  周期素依赖性激4抗体 规格: 0.1mlphospho-FXYD1 (Ser83)  磷酸化磷酸神经膜抗体 规格: 0.1ml

UTS2D  尾加压素2相关肽抗体 规格: 0.2mlPhospho-SGK1 (Thr256)  磷酸化糖皮质激素调节激1抗体 规格: 0.1ml

IL-33  白介素33抗体 规格: 0.1mlIL-15  白介素15抗体 规格: 0.1ml

phospho-EGFR (Ser1070)  磷酸化表皮生因子受体抗体 规格: 0.1mlCKAP4  细胞骨架相关蛋白4抗体 规格: 0.2ml

human C3  补体C3抗体 规格: 0.1mlCD38  CD38抗体 规格: 0.1ml

IQCA1  IQCA1蛋白抗体 规格: 0.2mlGLUT3  葡萄糖转运蛋白3抗体 规格: 0.1ml



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