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糖原磷酸化酶a(GPa)测试盒紫外分光光度法

产品厂地: 上海市
访问次数: 129
更新时间: 2022-05-30
描述:糖原磷酸化酶a(GPa)测试盒紫外分光光度法公司正在出售的产品:Rustigian氏尿素肉汤进口、国产Rustigian Urea Broth100克细菌尿素试验改良CAMP-BAP氏基础进口、国产CAMP-BAP Agar Base Modified250克弯曲杆菌选择性分离培养空肠弯曲菌基础进口、国产Skirrow Medium Base250克用于空肠弯曲菌的分离培养空肠弯曲菌琼脂基础进口、

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6983

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,7个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

糖原磷酸化酶a(GPa)测试盒紫外分光光度法

50管/48样

紫外分光光度法

BK-01S6983

商品介绍:

测定意义:

糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylaseGPEC 2.4.1.1))是糖原分解代谢的关键酶,使糖原分子从非还原端逐个断开α-14-糖苷键移去葡萄糖基,释放1-磷酸葡萄糖,直至临近糖原分子α-16-糖苷键分支点前4个葡萄糖基处。GP分为有活性的糖原磷酸化酶aGPa)和无活性的糖原磷酸化酶bGPb)两种形式。糖原的分解主要在GPa的催化下进行。

测定原理:

未添加激活剂时,GPa催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH,在340nm下测定NADPH上升速率,即可反映GPa活性。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
QQ截图20220307153537.png

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

吖啶黄素(2.5mg/支)  1ml/支*5

2500U 末端脱氧核苷转移  

250mL Phosphate Buffer,0.5M, pH9.5  Phosphate Buffer,0.5M, pH9.5  常温保存

0.5mL X-Gal干粉 X -Gal Powder -20℃避光保存

2 ug pOTB7 PPP2R1A pOTB7 PPP2R1A 低温运输,-20℃保存

明胶  20支

1瓶 WPMY-1细胞株 WPMY-1 低温运输和保存

志贺氏菌增菌肉汤-新生 Shigella Broth 250g

100g L- 谷 L-Glutamic Acid 室温密封保存

MC(不含琼脂)  250g

0.1mg 山羊抗兔IgG,荧光素488标记 Goat Anti-Rabbit IgG ,IF488 Conjugate  4℃保存

糖原磷酸化酶a(GPa)测试盒紫外分光光度法SRRM4  丝/相关核基质蛋白4抗体 规格: 0.2ml

PSCD1  细胞附着蛋白PSCD1抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-Goat IgG/PE  PE标记的兔抗羊IgG 规格: 0.1ml

Amisyn  突触融合结合蛋白6抗体 规格: 0.2ml

VCAM-1  管内皮细胞粘附分子抗体 规格: 0.1ml

SH2D1A/SAP  信号传导T淋巴细胞活化相关蛋白抗体 规格: 0.2ml

hnRNP M/CEAR  异质性核糖核蛋白M抗体 规格: 0.2ml

SLC39A11  溶质载体家族39成员11抗体 规格: 0.2ml

GAJ/MND1  减数分裂核分裂蛋白1抗体 规格: 0.2ml

VSV-G tag  VSV-G tag标签抗体 规格: 0.1ml

Mouse Anti-rat IgG/Cy5.5  Cy5.5标记的小鼠抗大鼠IgG 规格: 0.1ml

Phospho-Bad(Ser155)  磷酸化相关死亡促进因子抗体 规格: 0.1ml

 


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