马隐秘杆菌PCR检测试剂盒说明书

原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术原理：
 DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
       在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
       发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。

美利曲辛 CAS  *  规格： 100mg

富马酸喹平 CAS 111974-72-2 *  规格： 100mg

络石藤 CAS  *  规格： 1g

赤胫散 CAS  *  规格： 0.2g

右旋糖酐分子量D2 CAS  *  规格： 0.2g/支

莲子心 CAS  *  规格： 3g

广藿香油 CAS 2233340 *  规格： 1ml

青 CAS  *  规格： 100mg

*二化物 CAS 64806-05-9 *  规格： 50mg

芍药苷 CAS 23180-57-6 *  规格： 20mg

当药苷 CAS 14215-86-2 *  规格： 20mg

* CAS 86189-69-7 *  规格： 100mg

五灵脂 CAS  *  规格： 1g

5-｛4-［2-（5-乙基-2-基） CAS  *  规格： 50mg

银杏内酯B CAS 15291-77-7 *  规格： 20mg

马隐秘杆菌PCR检测试剂盒说明书性  Acid black B  731.71分子量： C36H23N5Na2O6S2*：3071-73-6

性红3B  Acid red 3B  872.8271分子量： C40H34N4Na2O12*：6459-69-4

1-(甲酰甲)氯吡  172.61  1- (Xian Jiaji An Jijia)*：41220-29-5分子量： C7H9ClN2O

1-BOC-3-  210.27  1-BOC-3- cyano piperidine*：91419-53-3分子量： C11H18N2O2

*  Fu Xiting  309.33分子量： C17H18F3NO*：54910-89-3

(S)-1-Boc-3-氨甲  214.3  (S) -1-Boc-3- ammonia methyl piperidine*：140645-24-5分子量： C11H22N2O2

1-甲-4-乙氧羰-5-磺吡唑  233.24  1- methyl -4- ethoxycarbonyl -5- pyrazole sulfonamide*：分子量： C7H11O4N3S

六氯铼(IV)酸钾  477.12  Hexachloro rhenium (IV) acid potassium*：16940-97-9分子量： Cl6K2Re

1-苄氧-3-  310.13  1- benzyloxyl iodobenzene -3-*：107623-21-2分子量： C13H11IO

肉苁蓉苷A  Boschnaloside A  分子量：*：14-1001

β-倒捻子素  Beta a-mangostin  424.4902分子量：C25H28O6*：20931-37-7