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异尖线虫属PCR检测试剂盒说明书

产品厂地: 上海市
访问次数: 83
更新时间: 2021-11-12
描述:异尖线虫属PCR检测试剂盒说明书上海帛科生物相关产品:* CAS 14638-18-7 * 规格: 200mg

蒲公英 CAS * 规格: 0.5g

甘草苷 CAS 551-15-5 * 规格: 20mg

熊果酸 CAS 77-52-1 * 规格: 20mg

产品介绍

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注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

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英文名称

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 异尖线虫属PCR检测试剂盒说明书

 Anisakis spp.PCR

BK-P8792

原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。

莪术醇 CAS  *  规格: 100mg

* CAS 58-38-8 *  规格: 100mg

生长激素 CAS  *  规格: 0.61ug

人瘤病L1基因分型参考品 CAS  *  规格: 100ul/管,30管/套

荜茇 CAS  *  规格: 1g

* CAS 1229-29-4 *  规格: 100mg

阿莫林 CAS 26787-78-0 *  规格: 100mg

维生素E CAS 14638-18-7 *  规格: 200mg

蒲公英 CAS  *  规格: 0.5g

甘草苷 CAS 551-15-5 *  规格: 20mg

熊果酸 CAS 77-52-1 *  规格: 20mg

藁本内酯 CAS  *  规格: 约0.1mL

四环素 CAS  *  规格: 200mg

* CAS 20977-05-3 *  规格: HPLC≥98%,20mg/支

白桦脂醛 CAS 13159-28-9 *  规格: HPLC≥98%,20mg/支

异尖线虫属PCR检测试剂盒说明书2-溴-5-吡  173.01  2- -5- amino pyridineCAS号:13534-97-9分子量: C5H5BrN2

对氯  238.45  The chlorine iodobenzeneCAS号:637-87-6分子量: C6H4ClI

4-叔丁邻二甲腈  184.24  4- tert butyl phthalate twoCAS号:32703-80-3分子量: C12H12N2

溶剂橙2  Solvent Orange 2  262.31分子量: C17H14N2OCAS号:2646-17-5

磺阿曲库铵  Benzene sulfonic acid  1243.48分子量: C65H82N2O18S2CAS号:64228-81-5

草查尔酮A  Grass chalcone A  338.39698分子量:C21H22O4CAS号:58749-22-7

间氧甲  184.23  Benzene oxygen groupCAS号:3586-14-9分子量: C13H12O

*  Gourd  分子量:CAS号:7257-29-6

4'-溴-α,α,α''-三吡  312.17  4'- bromo alpha, alpha, alpha three''- pyridineCAS号:149817-62-9分子量: C15H10BrN3

8-甲氧-2-甲喹啉  173.22  8- methyl group -2-CAS号:3033-80-5分子量: C11H11NO

9-(4-乙炔)咔唑  267.33  9- (4- phenyl acetylene) carbazoleCAS号:262861-81-4分子量: C20H13N

技术原理:
 DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
       在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
       发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。

 

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