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脱氢酶(DHA)测试盒可见分光光度法

产品厂地: 上海市
访问次数: 142
更新时间: 2022-05-30
描述:脱氢酶(DHA)测试盒可见分光光度法公司正在出售的产品:虎红钠盐琼脂进口、国产Rose Bengal Agar250克生物制品真菌、酵母菌计数沙氏琼脂进口、国产Sabouraud′s Agar250克用于真菌检测改良沙氏琼脂进口、国产Sabouraud′s Agar,Modified250克真菌检测沙氏液体进口、国产Liquid Sabourand Medium250克真菌、酵母菌增菌培养

产品介绍

品牌其他品牌货号BK-01S6944

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:脱氢酶(DHA)测试盒可见分光光度法

产品规格:50管/48样

检测方法:可见分光光度法

产品货号:BK-01S6944

产品分类:其它系列
商品介绍:

测定意义:

脱氢酶(dehydrogenase, DHA) 是一类催化物质氧化还原反应的酶,催化底物通过细胞色素系统被氧化,释放的能量供机体使用,是生物体取得能量的一种方式。

测定原理

在细胞呼吸过程中,氢受体2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC)在脱氢酶作用下接受氢以后,被还原为三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone, TF),TF呈现红色,于485nm测定其吸光值,即得脱氢酶活性。

自备实验仪器及用品

天平、恒温培养箱或水浴锅、低温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、冰、蒸馏水、甲醇(不允许快递,请用户自备)。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

1%NaCl蔗糖  20支

2 ug pYES4NT/C pYES4NT/C 低温运输,-20℃保存

50次 M13噬菌体单链基因组DNAout  

2 ug pET-24a(+) pET-24a(+) 低温运输,-20℃保存

PBS缓冲液(PH7.4) PBS Solution 250g

1瓶 4647细胞株 4647 低温运输和保存

1盒 无内毒素枪头,1 mL  

24 T 一氧化氮合成测试盒 Oxidative Stress Detection Kit 常温保存

250mL MES Buffer,1.0M,pH6.5   MES Buffer,1.0M,pH6.5   常温保存

250ug lambda(λ) DNA(不含N6-甲基腺) Lambda DNA(λ DNA) -20℃保存

2 ug pQE-40 pQE-40 低温运输,-20℃保存

脱氢酶(DHA)测试盒可见分光光度法IKBKE/IKKi  核因子κB抑制蛋白E抗体 规格: 0.1ml

DECR1  线粒体2,4-双烯酰辅A还原1抗体 规格: 0.1ml

phospho-c-Jun(Thr249)  磷酸化原基因c-Jun抗体 规格: 0.1mlphospho-G3BP1(Ser232)  磷酸化Ras GTP活化蛋白结合蛋白1抗体 规格: 0.1ml

Paxillin  桩蛋白Paxillin抗体 规格: 0.1mlCECR6  猫眼综合征染色体候选基因6抗体 规格: 0.2ml

REG1β/REG1 beta  胰岛细胞再生因子β抗体 规格: 0.2mlASAM/ACAM  脂肪细胞特异性粘附分子抗体 规格: 0.1ml

CTRP1/G protein coupled receptor interacting protein 1  G蛋白偶联受体相互作用蛋白1抗体(补体Clq TNF相关蛋白1) 规格: 0.2mlId1  DNA结合抑制因子1抗体 规格: 0.2ml

SLC27A1  链脂肪酸转运蛋白1抗体 规格: 0.2mlDR6/CD358  瘤细胞调亡素/瘤坏死因子受体死亡受体6抗体 规格: 0.2ml

PDZD6  PDZ结构域PDZK6蛋白抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的兔抗猴IgG 规格: 0.1ml

NCF/NCF4/p40phox  嗜中性粒细胞胞浆因子4抗体 规格: 0.1mlCK I alpha/STK  丝/苏蛋白质激抗体Casein kinase Ⅰα(CKⅠα) 规格: 0.1ml

SIRT6  沉默调节相关蛋白6抗体 规格: 0.2mlphospho-ERK5(Ser496)  磷酸化细胞外信号调节激5抗体 规格: 0.1ml

TSPAN2  四分子交联体2抗体(四旋蛋白) 规格: 0.2mlMyelin PLP  髓磷酯髓鞘蛋白1抗体 规格: 0.2ml

JMJD2A/KDM4A/JHDM3A  组蛋白去甲基化JMJ2A抗体 规格: 0.2mlAlpha-Synuclein/Syn/SNCA  核突触蛋白α抗体 规格: 0.1ml 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

 


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