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PCR检测试剂盒的检验方法介绍

时间:2021-12-22 浏览次数:16

       PCR反应得以进行并释放荧光信号。利用荧光定量PCR仪对PCR过程中相应通道信号进行实时监测和输出,实现检测结果的定性分析。
  PCR检测试剂盒检验方法:
  1.试剂准备(试剂准备区)
  (1)从冰箱中取出试剂盒,从试剂盒中取出实验所需试剂,充分融化混匀并瞬时离心以去除管壁附着液体。
  (2)核算当次实验所需要的反应数(n),并根据如下表所示反应体系计算当次实验所需要的各种试剂量。
  (3)在无菌离心管中加入上述试剂,充分混匀后瞬时离心。按照20μL/管分装量将试剂分装至PCR反应管。
  2.样本准备(样本处理区)
  用QIAGEN、Roche公司RNA提取试剂盒提取RNA,具体操作按照其试剂盒说明书操作。
  3.加样
  在上述制备好的PCR反应样本管中分别加入处理好的待测标本RNA各5μL、终体积25μL/管,盖好PCR反应盖混匀后瞬时低速离心,转移到PCR仪器上。阴性对照和阳性对照管则各加5μL试剂盒自带的阴性对照或阳性对照品,终体积为25μL/管,盖好PCR反应盖混匀后瞬时低速离心,转移到PCR仪器上。
  4.PCR(PCR扩增区)
  取样本处理区准备好的PCR反应管,放置在实时荧光定量PCR仪样品槽相应位置,并记录放置顺序。
  以上就是PCR检测试剂盒的检验方法,希望能对您有所帮助
  

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