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一文快速了解探针法PCR检测试剂盒

时间:2021-11-10 浏览次数:25

       关于探针法PCR检测试剂盒,你的了解有多少呢?小编来带你了解一下
  本试剂盒采用探针法实时荧光PCR技术,设计一对EB病毒特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对EB病毒的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对病原学辅助诊断。
  1DNA提取
  1)对上述处理好的标本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液),100℃恒温处理10min,13,000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mLEP管,-20℃保存;
  2)DNA的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(离心柱提取法),请严格按照试剂盒说明书进行操作。
  ​
  2.探针法PCR检测试剂盒检测方法的局限性
  a.样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关;
  b.样本提取过程中没有控制好交叉污染,会出现假阳性结果;
  c.阳性对照、扩增产物泄漏,会导致假阳性结果;
  d.病原体在流行过程中基因突变、重组,会导致假阴性结果;
  f.试剂运输,保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,出现假阴性或定量检测不准确的结果;
  g.本检测结果仅供参考,如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
  结果判断
  阳性:检测通道Ct值≤35.0,且曲线有明显的指数增长曲线。
  可疑:检测通道Ct值>35.0,且出现典型扩增曲线的样本建议重复试验,重复试验结果出现Ct值≤35.0和典型扩增曲线者为阳性,否则为阴性。
  阴性:样本检测结果无Ct值且无明显的扩增曲线。

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