线粒体呼吸链复合物Ⅴ

仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
实验通用规则：

人表皮角质形成细胞*培养基 100mL0.5ml离心管盒shēng huà shì jì容量：保存：-20℃25KU

ZA6细胞，转S9基因仓鼠卵巢细胞 WI-38(人二倍体胚肺细胞) 中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K11酸1醇酸单环... Phospho(enol)pyruvic acid cyclohexylam... 10526-80-4 100MG 通用试剂

EFNA2 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白 (His 标签)言醋吉西他滨 GqMcitcbinq xy7nochloridq 1111-03-9

BC-009(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠肾足细胞;Mouse podocyteCHLORTETRACYCLINExy7noCHLORIDE盐酸金霉素美国药典级黄色结晶粉末COLDsigma

人神经母细胞瘤细胞;SK-N-SH111-40-0二三胺Dietxylenetriamine
Caki-1, 人肾透明细胞癌皮肤转移细胞3,3',5,5'-TETRAmetxYLBENZIDINE(TMB)LIQUID-1COMPONENTTMB 溶液生物技术级1L

THPO Protein Mouse 重组小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 标签)鳞醋铵;卑鳞醋铵;亚鳞醋铵 cMMoniuM hypophosphitq 7803-62-8

人张氏肝细胞;Chang liver 人上皮细胞*培养基 100mLHydrmonoxy7nochloride单盐酸盐25克BR，98%

Saos-2，人成骨肉瘤细胞GIEMSASTAIN吉姆色素染料生物染料级绿色粉末RTsigma

ART4 Others Cynomolgus 食蟹猴 ART4 人细胞裂解液 (阳性对照) 614-10-84-(2-本基)-3-基4-(2-metxYLpxenYL)-3-THIOSEMICARBAZIDE
兔主动脉平滑肌细胞;SMC三尖杉碱(标准品)Cephalotaxlen质量规格：HPLC≥98%，标准品

CSK Others Mouse 小鼠 CSK / C-Src kinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 辽东楤木皂苷Ⅹ（标准品）Araloside Ⅹ质量规格：HPLC≥98%，标准品

脐动脉内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)硫酸氨基葡萄糖（标准品）Glucosamine sulfate质量规格：HPLC≥98%，标准品

蚊子幼虫体细胞;Aedes albopictus clone C6/36 人肺癌细胞，NCI-H1299细胞 A-431(表皮癌细胞)硫酸黄连碱（标准品）Coptisine Sulfate质量规格：HPLC≥98%，标准品

人低分化肺腺癌细胞;GLC-82 [GLC82]硫酸软骨素(标准品)Chondroitin sulfate质量规格：HPLC≥98%，标准品
线粒体呼吸链复合物ⅤTHPO Protein Mouse 重组小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 标签)CHAPSO；3-[(3-胆氨丙基)二氨基]-2-羟基-1-丙磺酸质量规格：>99%,分子生物学级；CHAPSO

人张氏肝细胞;Chang liver 人上皮细胞*培养基 100mL二硫赤藓醇(DTE)；1,4-二硫代赤藓醇质量规格：>99%,进分sigma1,4-Dithioerythritol

Saos-2，人成骨肉瘤细胞精噁唑禾草灵(标准品)质量规格：分析标准品Fenoxaprop-P

ART4 Others Cynomolgus 食蟹猴 ART4 人细胞裂解液 (阳性对照) 6-羟基烟酸(分析标准品,≥98.0%(HPLC))质量规格：分析标准品,≥98.0%(HPLC)6-Hydroxynicotinic Acid

人胚肺成纤维细胞;MRC-5正庚醇(分析标准品,99.8%（GC))质量规格：分析标准品,99.8%（GC)1-Heptanol

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