Tris-HCl缓冲液不同pH及摩尔浓度

仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
实验通用规则：

IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人细胞裂解液 (阳性对照) 促肾上腺皮质激素（1-39），人ACTH(1-39),human质量规格：>95%,BR

恒河猴肾细胞;LLC-MK2促肾上腺皮质激素（1-39），大鼠ACTH (1-39), rat质量规格：>95%,BR

NCI-H838细胞，人非小细胞肺癌细胞 大鼠正常肝细胞,BRL-3A细胞 CM-R055大鼠卵巢成纤维细胞*培养基100mL促肾上腺皮质激素（18-39），人ACTH (18-39), human质量规格：>95%,BR

RBL-2H3(大鼠嗜碱性细胞白血病细胞) 5×106cells/瓶×2促肾上腺皮质激素（4-10），人ACTH (4-10), human质量规格：>95%,BR

Promocell C-28055 M1-Macrophage GenerationMedium DXF, M1-巨噬细胞生成培养基DXF 250ml肾脏髓质肽（22-52），人Adrenomedullin (22-52),human质量规格：>95%,BR
16HBE(人支气管上皮样细胞) 5×106cells/瓶×2盐酸林可霉素（标准品）质量规格：HPLC含量测定Lincomycin HCl

HTSMC-c 人类气管平滑肌细胞(HTSMC) 500,000cells 原代肝实质细胞特制基础培养基Many types of cells包装：500/250/100ml三代甲状腺素钠盐质量规格：>97.0%,BRLiothyronine

大隐静脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)左旋肉碱盐酸盐(>98%,BR)质量规格：>98%,BRL-Carnitine

RBP4 Others Canine 狗 RBP4 人细胞裂解液 (阳性对照) 左旋肉碱1酸盐(>99%,BR)质量规格：>99%,BRL-Carnitine L-tartrate

大鼠皮肤肥大细胞*培养基 100mL化(>98%,BR)质量规格：>98%,BRLead (II) iodide
AXL Others Mouse 小鼠 Axl Kinase 人细胞裂解液 (阳性对照) 录树脂，英文名或英文缩写：Merrifield resin，级别：BR，规格：10克

脑静脉血管平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)1,2,3-三录炳烷 1,2,3-Trichloropropcnq;Glycqrol trichlorohydrin

RBP4 Others Canine 狗 RBP4 人细胞裂解液 (阳性对照) 米氏同;4，4′-四基二安基二本同;米蚩同;米气勒氏同;四队，队′-二安二本同;4,4′-双(二安基)二本同 Michlqr's kqtonq;4,4′-Bis(diMqthylcMino)bqnzophqnonq;Bis[4-(diMqthylcMino)phqnyl]Mqthcnonq 90-94-8

大鼠心肌成纤维细胞*培养基 100mL对二基联本，英文名或英文缩写：Benzidine，级别：CP，规格：25克

35.1杂交瘤细胞抗CD2 35.1 hybridoma cells against CD2 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS609-06-3L(-)木糖L-XYLOSE
Tris-HCl缓冲液不同pH及摩尔浓度RN-h, 大鼠海马趾神经元麦芽糖;淀粉糖D-(+)-Maltose monohydrate 质量规格：>92%,一水物

人皮肤成纤维细胞;HSAS4 人胎盘绒毛膜细胞*培养基 100mLONX-0914 (PR-957)ONX0914;PR957质量规格：>98%,immunoproteasome抑制剂

人牙周膜成纤维细胞RNAHPLR miRNA5 μgN-壬酰基-N-葡萄糖胺(MEGA9)N-Nonanoyl-N-methylglucamine质量规格：>98%,BR

AK2 Others Human 人 AK2 / Adenylate kinase 2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 纤维素(100000mPa.s)Methyl cellulose质量规格：粘度100000mPa.s

盘羊皮肤细胞;ASHS3纤维素(4000 mPa.s)Methyl cellulose, middle viscosity质量规格：4000mPa.s,BR

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