显色法，冰冻切片

仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
实验通用规则：

ERBB3 Others Human 人 ErbB3 / HER3 人细胞裂解液 (阳性对照) 延胡索乙素；消旋延胡索乙素(标准品)质量规格：HPLC≥98%,BRTetrahydropalmatine

小香猪皮肤细胞;SSC-S2延胡索乙素；消旋延胡索乙素质量规格：HPLC≥98%,BRTetrahydropalmatine

SPN Others Rat 大鼠 SPN / CD43 / Sialophorin 人细胞裂解液 (阳性对照) 孕1醇酮醋酸酯,孕1诺龙乙酸酯质量规格：>98%,BRPregnenolone Acetate

CL-0165NCI-H1299(人非小细胞肺癌细胞)5×106cells/瓶×2孕1醇酮醋酸酯(标准品)质量规格：>98%,标准品Pregnenolone Acetate

L129细胞，NCTC克隆929细胞 人Butt`s瘤细胞,Raji细胞 小鼠小胶质细胞;BV2灵芝醛A(标准品)质量规格：HPLC≥95%,标准品Ganoderal A
人甲状腺滤泡上皮细胞*培养基 100mL氧化钙(块)(>98%，BR)质量规格：>98%，BRCalcium oxide lump

Malmc细胞，人皮肤纤维微细胞系 光滑念珠菌 杂交瘤(B类);IB3C10H12A12G2H8F31酸二氢钙一水(85%~95%,BR)质量规格：85%~95%,BRCalcium phosphate, monobasic, monohydrate

PPBP Protein Human 重组人 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (His 标签)无水硫酸钠(分析标准品,pestizides≤1 ppm)质量规格：分析标准品,pestizides≤1 ppm sulfate anhydrous

MDA-MB-435S(人导管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD1 / PDCD1 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲嘧磺隆(标准品)质量规格：分析标准品Sulfometuron-methyl

仓鼠卵巢细胞;Lec1西草净(分析标准品,97%)质量规格：分析标准品,97%Simetryne
TCN2 Others Mouse 小鼠 TCN2 / anscobalamin-II 人细胞裂解液 (阳性对照) Toosendanin苦楝素10毫克超，98%

PA319 人大肠癌细胞二十二醇 1-Docoscnol 661-19-8

CL-0466WI38/VA13(SV-40Z转化肺成纤维细胞)5×106cells/瓶×2L-正缬酸容量：1公斤

小鼠神经干细胞(EGFP标记)wo7iumphosphotungstate十二钨酸嶙酸钠水合物500克CP，98%

人细胞;1301 人肠动脉内皮细胞*培养基 100mL589-92-44-4-metxylcyclohexanone
显色法，冰冻切片CM-H013人小气道平滑肌细胞*培养基100mL奎宁单盐酸盐二水合物Quinine  dihydrate质量规格：>99%

MOLT-4细胞，急性母细胞白血病细胞 髓性甲状腺癌细胞,TT细胞 EB病毒转化的人B细胞(傣族);KM94031--1,2,4-三唑1-METHYL-1,2,4-TRIAZOLE质量规格：>98%

615小鼠T细胞性白血病瘤株;L7712甲啶铂,吡铂Picoplatin质量规格：>99%,BR

CD3E Others Human 人 CD3E 人细胞裂解液 (阳性对照) 4-硝基苄眯盐酸盐4-NitrobenziMidaMide HCl质量规格：>97%

人肾皮质近曲小管上皮细胞;HK-2脲,尿素Urea质量规格：AR

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