肌酐Cr测试盒肌氨酸氧化酶法

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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
CM-M011小鼠肺大动脉内皮细胞*培养基100mL腺苷 2′(3′)-单1酸混合异构体 质量规格：美国进口Adenosine 2'(3')-monophosphate mixed isomers

小鼠前胃癌细胞;MFC 小鼠甲状腺上皮细胞*培养基 100mL腺苷5'-二1酸核糖钠质量规格：美国进口Adenosine 5'-diphosphoribose  salt

人脑微血管内皮细胞 Human8-叠氮-环二1酸腺苷-核糖质量规格：美国进口8-Azido-cyclic adenosine diphosphate-ribose

NRXN3 Others Human 人 Neurexin-3-beta / NRXN3 人细胞裂解液 (阳性对照) 8-氨基腺嘌呤核苷质量规格：美国进口8-Amino Adenosine

转PYTL基因小鼠支持细胞;15P-1腺苷-5'-二1酸三锂盐质量规格：>97%,BRADP.Li3
CL-0364HuT 78(人T细胞白血病细胞)5×106cells/瓶×2梭菌蛋白酶质量规格：酶活：>50U/mg,进分Clostripain

HSC-T6, 大鼠肝星状细胞系 人绒癌细胞VP16耐药株TNFa转染，JEG-3/VP16-TNFa细胞 7F2(小鼠杂交瘤细胞)2'-脱氧鸟苷-5'-一1酸二钠盐(分子生物学级)质量规格：>98%，分子生物学级dGMP, 2'-Deoxyguanosine-5'-monophosphate di salt

人肺癌细胞;A-427 [A427]三十二烷(standard for GC,≥98.0%(GC))质量规格：standard for GC,≥98.0%(GC)Dotriacontane

CD7 Others Mouse 小鼠 CD7 人细胞裂解液 (阳性对照) 正庚醇(Standard for GC,>99.5%(GC))质量规格：Standard for GC,>99.5%(GC)1-Heptanol

SV40T转化的人胚肾细胞;293Tγ -丁内酯（GBL）(standard for GC,≥99.9%(GC))质量规格：standard for GC,≥99.9%(GC)4-Hydroxybutanoic acid lactone
TNF Protein Mouse 重组小鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白锡粉100克

大鼠颗粒细胞(RGC)(1×106) U-2 OS, 人骨肉瘤细胞 Human4-氧基本安;队氧基本安;队茴香安;队安基本迷 4-Mqthoxycnilinq;p-cnisidinq;4-cMinocn-isolq;4-MqthoxybqnzqncMinq;p-cMinophqnyl Mqthyl qtqr

人胚肺二倍体细胞;2BS硅胶5KU

IGSF8 Others Mouse 小鼠 PGRL / IGSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) 皂土5克

人肾动脉平滑肌细胞*培养基 100mL(妥布拉霉素)
肌酐Cr测试盒肌氨酸氧化酶法大鼠胰腺外分泌腺细胞;AR42J活性炭(净水、气体化,棒,φ4.0mm)Activated charcoal质量规格：净水、气体化,棒,φ4.0mm

杂交瘤(B类);IB3C10H12A12G2H8F3 小鼠视网膜神经节细胞*培养基 100mL活性炭(药物脱色,200目)Activated charcoal质量规格：药物脱色,200目

HUVEC-12, 人脐静脉血管内皮细胞系 Human活性炭(细胞培养级)Activated charcoal质量规格：细胞培养级

TNFRSF11B Others Human 人 TNFRSF11B / OCIF 人细胞裂解液 (阳性对照) 活性炭(植物细胞培养级)Activated charcoal质量规格：植物细胞培养级

人脐静脉内皮细胞;HUV-EC-C10X分子筛(干燥剂用) 质量规格：干燥剂用
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。