磷酸果糖激酶PFK测试盒

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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
CL-0407NCTC 1469(小鼠正常肝细胞)5×106cells/瓶×2雷美替胺质量规格：>98.5%Ramelteon

SELE Others Cynomolgus 食蟹猴 E-Selectin / CD62e / SELE 人细胞裂解液 (阳性对照) 拉科酰胺质量规格：>98%Lacosamide

人脑微血管内皮细胞RNAHBMEC miRNA5 μg米那普仑盐酸盐 质量规格：>98%Milnacipran

MCF-7/ADR细胞，人癌细胞(耐阿霉素) 早代小鼠胚胎成纤维细胞,MEF细胞 AGS人胃腺癌细胞阿德福韦/阿德福韦酯（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Adefovir dipivoxil

MKN45(人胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2R-盐酸普拉克索质量规格：度大于99%,R构型R-Pramipexole Di Monohydrate
GRC-1细胞，人肾癌细胞 鼠纤维肉瘤细胞系,WEHI 164细胞 CL-0446SUP-B15(人Ph+急淋白血病细胞系)5×106cells/瓶×2钼标准溶液(100µg/mL,基体: 1%HCl)质量规格：100µg/mL,基体: 1%HClMolybdenum standard

EJ(人膀胱癌细胞) 5×106cells/瓶×2水质镍标样(浓度范围:0.959-1.01(mg/L),分析标准品)质量规格：浓度范围:0.959-1.01(mg/L),分析标准品Nickel standard

hCD34+-CB-c single donor 从脐带血提取的人类CD34+祖细胞(hCD34+-CB)，单一来源 100000 人卵巢成纤维细胞HOF内消旋-2,3-二丁二酸(>98.0%(T))质量规格：>98.0%(T)meso-2,3-Dimercaptosuccinic Acid

MN-h, 小鼠海马神经元吡哆醛-L-谷氨酸二钾盐[药物研究配体]质量规格：药物研究配体Pyridoxylidene-L-glutamic Acid Dipotassium Salt

LTBR Others Rat 大鼠 LTBR / TNFRSF3 人细胞裂解液 (阳性对照) 吡哆醛-L-异亮氨酸钾盐[药物研究配体]质量规格：药物研究配体Pyridoxylidene-L-isoleucine Potassium Salt
ERBB4 Others Mouse 小鼠 HER4 / ErbB4 人细胞裂解液 (阳性对照) 头孢喹诺质量规格：美国进口Cefquinome

人皮肤肥大细胞*培养基 100mL头孢噻呋质量规格：美国进口Ceftiofur

ψ2细胞，小鼠胚成纤维包装细胞 Jecket(瘤细胞) 大鼠肺细胞;WL1盐酸头孢噻呋(进口)质量规格：美国进口Ceftiofur

EFNA5 Protein Rat 重组大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 标签)布立尼布质量规格：美国进口Brivanib

A-498(人肾癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠单核巨噬细胞;J774A.14-苯甲酰-4'-二苯硫(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)4-Benzoyl 4'-Methyldiphenyl Sulfide
磷酸果糖激酶PFK测试盒人肺癌细胞;A-427 [A427] 大鼠破骨细胞*培养基 100mL虎杖甙/虎杖苷/白藜芦醇苷(标准品)Polydatin质量规格：HPLC≥98%,标准品

EL4.IL-2 小鼠瘤细胞十八烷醇,1-十八醇(标准品)1-Octadecanol质量规格：>98%,标准品

MET Others Mouse 小鼠 c-MET / HGFR 人细胞裂解液 (阳性对照) 十八烷醇,1-十八醇1-Octadecanol质量规格：>98%

人皮肤成纤维细胞;HSAS4Ruxolitinib (INCB018424)Ruxolitinib (INCB018424)质量规格：>99%

STAT4 Others Human 人 STAT4 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) MK-1775,MK1775 MK-1775质量规格：>98%,Wee1激酶抑制剂
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。