睡眠嗜血杆菌PCR检测试剂盒说明书

原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术原理：
 DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
       在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
       发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。

补体受体2(CR2)重组蛋白英文名称：Recombinant Complement Receptor 2 (CR2)

毛状黄色链霉菌 Streptomyces flavopilosus青霉菌 Penicillium sp．

沟肠杆菌 Enterobacter cloacae酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

猴菌 Hericium erinaceusCSC, 小鼠心肌细胞

成人表皮角化细胞*培养基100mL

XLD培养基/XLD琼脂培养基/木糖赖氨酸脱氧胆培养基/Xylose Lysine Desoxycholate Medium分离志贺氏菌属和沙门氏菌100克国产/进口

泾阳链霉菌 Streptomyces jingyangensis人肾动脉平滑肌细胞*培养基

Y3-Ag 1.2.3(大鼠骨髓瘤细胞)5×106cells/瓶×2

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarumB16-F10, 小鼠色素瘤高转移细胞

OP9(小鼠骨髓基质细胞)GoldCassette-TRX/TRX重组标签蛋白快速检测试剂盒(装)

香菇 Lentinula edodes丁香直丝链霉菌 Streptomyces lilacinorectus

睡眠嗜血杆菌PCR检测试剂盒说明书A875/黑色素瘤细胞Plant Protein Extraction Kit/植物蛋白提取试剂盒

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae胶红酵母 Rhodotorula mucilaginosa

棉小丛壳 Glomerella gossypii黑木耳 Auricularia auricula

人肺大静脉内皮细胞*培养基中分子量单一蛋白Marker（90 kD）

3T3-L1, 小鼠前脂肪细胞小鼠小肠平滑肌细胞*培养基

鼠杆菌 Lactobacillus murinus木糖葡萄球菌 Staphylococcus xylosus

斯氏假单胞菌 Pseudomonas stutzeri费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii

RAG(小鼠肾腺细胞)myc Tag IP/Co-IP Kitmyc标签免疫沉淀试剂盒

地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis沙氏杆菌 Lactobacillus sharpeae

根瘤菌 Rhizobium sp.草菇 Volvariella bombycina

SY5Y/神经母细胞瘤细胞小鼠膀胱上皮细胞*培养基

植物杆菌 Lactobacillus plantarum大鼠肾足突细胞*培养基

多脂鳞伞 Pholiota adiposa土曲霉 Aspergillus terreus

人心室肌细胞*培养基淡紫拟青霉 Paecilomyces lilacinus

SGC-7901, 人胃腺细胞系Lec1(仓鼠卵巢细胞)

地衣芽孢杆菌 Bacillus licheniformis嗜热脂肪地芽孢杆菌 Geobacillus stearothermophilus