着色霉PCR检测试剂盒说明书

技术原理：
 DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
       在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
       发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

高乌甲素 CAS  *  规格： HPLC≥98%；20mg/支

番泻苷元B; 番泻甙元B CAS 517-44-2 *  规格： HPLC≥98%,20mg/支

酸氨基葡萄糖;氨基葡萄糖酸盐 CAS 29031-19-4 *  规格： HPLC≥98%,20mg/支

琥珀酸；丁二酸 CAS  *  规格： HPLC≥99%；100mg/支

人参皂苷CK CAS  *  规格： HPLC≥98%,20mg/支

百蕊草素I；阿福豆苷；山柰酚-3-葡萄糖 CAS 40437-72-7 *  规格： HPLC≥98%,20mg/支

α-香附 CAS 473-08-5 *  规格： HPLC≥98%,20mg/支

大蓟苷: 柳穿鱼叶苷 CAS 28978-02-1 *  规格： HPLC≥98%,20mg/支

野漆树苷 CAS  *  规格： HPLC≥98%,20mg/支;

芦竹碱; 克胺; 3-二甲氨基吲哚; CAS 87-52-5 *  规格： HPLC≥98%,20mg/支

异甘草苷; 异甘草甙 CAS 5041-81-6 *  规格： HPLC≥98%,20mg/支

新原碱: 中原碱 CAS  *  规格： HPLC≥98%,20mg/支

绿原酸 对照品 CAS  *  规格： 20mg;97.3％

氧星 对照品 CAS  *  规格： 100mg;99.5％

盐 标准品 CAS  *  规格： 100mg

着色霉PCR检测试剂盒说明书孕酮受体(PGR)重组蛋白  Recombinant Progesterone Receptor (PGR)

枸橼酸培养基/柠檬酸培养基/Citrate Agar大肠杆菌和产气杆菌的鉴别250克国产/进口

菌核核盘菌神农架青霉 Penicillium shennongjianum

胰膘肉汤基础/胰示肉汤基础/胰月示肉汤基础/Tryptose Broth Base用于肺炎链球菌、布鲁氏菌细菌的培养250克国产/进口

屎肠球菌 Enterococcus faeciumK7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨细胞)

小鼠肝细胞  H22

IR983F(大鼠骨髓瘤细胞)壁画枝芽胞杆菌 Virgibacillus pantothenticus

DLD-1(人结肠腺细胞)豇豆慢生瘤菌 Bradyrhizobium vigna

酪胨琼脂/Peptone From Casein Agar药品、生物制品无菌试验250克国产/进口

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeSH-SY5Y(人神经母细胞瘤细胞)

MV3(人色素瘤细胞)短小芽胞杆菌 Bacillus pumilus