产气肠杆菌PCR检测试剂盒说明书

技术原理：
 DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
       在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
       发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

泽泻醇C-23-醋酸酯;Alisol C CAS 26575-93-9 *  规格： 10mg

紫苏醛;l-Perillaldehyde CAS 18031-40-8 *  规格： 20mg

原七叶皂苷元;Protoaescigen CAS 20853-07-0 *  规格： 20mg

异甘草苷; Isoliquiritin CAS 5041-81-6 *  规格： 20mg

鸢尾黄素;Tectorigenin CAS 548-77-6 *  规格： 20mg

药根碱;Jatrorrhizine CAS 6681-15-8 *  规格： 20mg

香荆芥酚;5-Isopropyl-2-m CAS 499-75-2 *  规格： 0.1ml

辛弗林（94-07-5）;Synephr CAS  *  规格： 20mg

突厥烯;Damascene CAS 23696-85-7 *  规格： 20mg

黄皮素;Kranjin CAS 521-88-0 *  规格： 20mg

桑皮苷C;Mulberroside C CAS 102841-43-0 *  规格： 20mg

射干苷;tectoridin CAS 611-40-5 *  规格： 20mg

20(S)-原人参二醇;Protopan CAS 30636-90-9 *  规格： 20mg

去甲槟榔次碱;Guvacine hydr CAS 498-96-4 *  规格： 20mg

七叶皂苷钠;Sodium Aescina CAS 20977-05-3 *  规格： 100mg

产气肠杆菌PCR检测试剂盒说明书橙皮素  HESPERITIN  302.29分子量：C16H14O6*：520-33-2

萘  Naphthalene  128.17分子量： C10H8*：91-20-3

原花青素  Primary anthocyanin  594.529分子量：C30H26O13*：4852-22-6

洛塞琳  Rosarin  428.43分子量：C20H28O10*：84954-93-8

2,5-二溴-1,4-二甲  263.96  2,5- dibromo -1,4- two methyl benzene*：1074-24-4分子量： C8H8Br2

5-硝异喹啉  174.16  5- nitro group*：607-32-9分子量： C9H6N2O2

一水合硫酸锰  169.02  Hydrated manganese sulfate*：10034-96-5分子量： MnSO4.H2O

磺酸钴  251.1  Cobalt amino sulfonic acid*：14017-41-5分子量： CoH4N2O6S2

考马斯亮蓝G250  Kaumas blue G250  854.02分子量： C47H48N3NaO7S2*：6104-58-1

4-乙炔甲  116.16  4- acetylene*：766-97-2分子量： C9H8； CH3C6H4C≡CH

2,2,2,3',4'-五氟乙  210.1  2,2,2,3', 4'- five benzene fussol*：302912-28-3分子量： C8H3F5O