犬腺病毒PCR检测试剂盒规格

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

胰岛素(INS)重组蛋白英文名称：Recombinant Insulin (INS)

含RNA结合冷休克域蛋白E1(CSDE1)重组蛋白英文名称：Recombinant Cold Shock Domain Containing Protein E1, RNA Binding (CSDE1)

人颅盖造骨细胞*培养基100mL

甘露醇卵黄培养基基础/卵黄甘露醇高琼脂基础/Egg-Yolk Mannitol Salt Agar Base金黄色葡萄球菌的分离培养250克国产/进口

Schenk&Hildebrandt Vitamin MixBR100毫升国产/进口

炭曲霉 Aspergillus carbonarius小鼠神经干细胞（EGFP标记）

枯草芽胞杆菌 Bacillus subtilis香菇 Lentinula edodes

白介素5(IL5)重组蛋白英文名称：Recombinant Interleukin 5 (IL5)

粘蛋白1(MUC1)重组蛋白英文名称：Recombinant Mucin 1 (MUC1)

人尿道上皮细胞*培养基人心肌成纤维细胞*培养基

BCIP/NBT KitBCIP/NBT碱性酶显色试剂盒40ml国产

犬腺病毒PCR检测试剂盒规格香菇 Lentinula edodes苜蓿中华根瘤菌

Calu-6(人肺退行性细胞)SK-MEL-1, 人皮肤黑色素瘤细胞

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae五通桥毛霉 Mucor wutungkiao

白色链孢囊菌 Streptosporangium album毛柄金钱菌(金针菇) Flammulina velutipes

人脉络膜微血管细胞*培养基粪产碱菌 Alcaligenes faecalis

小鼠成纤维细胞（EGFP标记）A549(人非小细胞肺细胞)

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae解脂亚罗酵母 Yarrowia lipolytica

黑化链霉菌 Streptomyces nigrificans苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

A549, 人肺细胞系PC-12(高分化)，PC12，大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株(高分化)

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae粘质沙雷氏菌 Serraita marcescens

玉蜀黍赤霉 Gibberella zeae发光假蜜环菌 Armillariella tabescens

人肺细胞真核细胞膜蛋白抽提试剂（带酶抑制剂）

EPC, 大鼠血管内皮祖细胞小鼠小肠血管内皮细胞*培养基

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae植物杆菌 Lactobacillus plantarum

胶冻样芽胞杆菌 Bacillus mucilaginosus费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii

I型胶原酶(含10mL酶解缓冲液)Multi-tagged Protein Lysate(293T)/多标签蛋白裂解液(293T)

技术原理：
 DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
       在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
       发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。